c18色谱柱的柱越长，总柱效越高（n值越大），柱越长，分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长，实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子，一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物；500—600mm，要求较高分辨率的应用，—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。

 

　　c18色谱柱的柱效率与柱半径平方成反比，内径越小柱效越高，但内径越大，柱容量也增加，允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时，则因柱内每块理论板内不能建立平衡，将会导致色谱蜂畸变，柱分辨率降低，重现性不好。

 

　　因此对于复杂样品需要准确分离，要使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物，为了增加样品容量就要使用内径大的柱子，目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。

 

　　如何更换色谱柱，液相色谱柱怎么换：

 

　　1、首先把原来仪器上的柱子用甲醇或其他有溶剂冲下干净后，冲去柱子中残留的缓冲盐和之前难以洗脱的组分。

 

　　2、然后把柱子两边的PEAK头拧下来，用配套的塞子将换下的柱子两头堵上。

 

　　3、换上新的色谱柱时，应先将需换上的柱子两边的塞子旋开，确定好柱子标示的方向后，先接柱子入口端，并使柱子出口端略高于入口端，这样就使流动相流过柱子时能将其中的气泡排出，待气泡排尽后，再接上柱子的出口端。

 

　　4、注意拆柱子时要关流速，后接柱子时要开流速。