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- 使用亲水C18色谱柱以下注意事项可别忘了
- 点击次数:3083 更新时间:2021-01-26
- 亲水C18色谱柱在用于分离疏水性化合物与常规的C18相具有相似的选择性,所以也可以作为一种通用C18柱使用。它是专为亲水性和极性化合物具有更强的保留能力和选择性而设计的。须注意以下事项:1、新亲水C18在使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗,作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展,使色谱柱的性能达到好状态。具体操作是,将配制好65%的乙腈/水冲洗后,把入口端连接在色谱仪上,出口端放空(不可连上检测器,以免污染了检测器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速将柱中的清稀溶液吹干,过20分钟后再接上检测器,以1.0ml/min的流速,继续冲洗2~8小时;2、液相色谱仪检测分析样品完毕后,须冲洗色谱柱。尤其是流动相中含有酸或盐时,需将柱中的酸或盐冲洗干净,通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积;3、若色谱柱处于长期闲置状态时,要将其冲洗,建议冲洗3-4小时以上,后保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水)中;4、由于亲水C18的固定相疏水性较强,在使用过程中尽量不要使用高水相条件,若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的负面影响;由于碳载量高,表现尤为明显,建议使用过程中水相比例不超过90%。