清洗：

　　再生被污染HPLC柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。

　　如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的清洗步骤来除去这些污染物往往就能恢复其色谱性能。经过等度运行后的反相c18色谱柱，有时用90～100％含量的溶剂B冲洗20个柱体积可以清除污染物。

　　如果使用的是缓冲盐系统，不要直接切换到强溶剂，突然转换到高浓度有机溶剂可能会使HPLC流动体系中的缓冲盐沉淀，这样会导致更大的问题

　　如果污染物不是生物质的，一种强溶剂或几种溶剂组合清洗基本能解决问题。反相c18色谱柱生产厂家的网页和产品说明书上很多也有清洗方法推荐。

　　所有的清洗方法的模式普遍都类似，溶剂系列中所用溶剂的强度逐级增加，后一个溶剂往往是非极性（疏水性）很强的，以便于溶解脂质、油类等非极性污染物。溶剂系列中每个溶剂都保证能与下一个溶剂互溶。

　　整个清洗过程结束后，在回到原来的流动相体系前，必须借助一个中等强度的互溶性非常好的溶剂过渡。