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- c18色谱柱的老化注意事项
- 点击次数:873 更新时间:2022-10-20
- c18色谱柱出厂时一般都封装有甲醇或乙腈等有机溶剂。随着时间的推移,色谱柱内的有机溶剂缓慢挥发,色谱柱内可能出现气泡。因此,新购买的色谱柱在使用前一般都要进行活化操作。c18色谱柱的基质:硅胶基质:通用的基质,强度大,化学修饰容易,但使用的pH值范围有限(一般为2—8,特殊修饰的可以达到1—12)。聚合物基质:多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化学稳定,应用pH范围宽,具有更强的疏水性,对蛋白质等样品分离效果较好;但强度较小,有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损,批次重复性较差,商品化色谱柱不多,一般价格较贵。载碳量:基质表面键合相的比例,载碳量高,则保留增加,适合分析非极性化合物。键合相:键合试剂不同,对化合物的选择性不同,一般长链的烷基键合相(C18、C8)比短链的(C4、C3)稳定;非极性的键合相比极性的键合相(-NH2)稳定。老化色谱柱是气相应用的一项常见工作,老化的目的在于去除固定相表面不稳定的固定相流失碎片或污染物,让色谱柱为即将进行的分析做好准备。通常,新柱初次使用、色谱柱放置一段时间后再次使用、或色谱柱受到一定污染或损伤后都需要进行适当的老化。老化的注意事项:1、老化的温度一般不要超过色谱柱的恒温温度上限,初次老化可以升温至色谱柱zui高使用温度(程序升温温度上限)老化一段时间,建议不超过10min;2、对于强极性色谱柱(如聚乙二醇固定相),建议采用较缓的程序升温,如5°C/min。