C18柱的填料对色谱柱的影响，碳含量即填料中的含碳量。传统的测量技术是将填料加热到碳氢键断裂，然后通过测定损失的重量或形成的二氧化碳来计算碳含量。可以通过增加碳键的长度或增加键合密度来增加碳含量。碳含量增加，柱子的保留值增加。键合相的色谱行为与键合密度有关，也与硅胶的密度及填料的表面积有关，填料的密度越高，填柱所需的硅胶量越多，柱子的含碳量也越高。如果用2种不同密度相同碳含量的填料填充柱子，其保留行为将明显不同。因此，单独以碳含量来预测色谱行为是不够的。

 

　　c18色谱柱在反相条件下基本上适合绝大部分物质。通过改变硅胶孔径，材质或者修饰C18(嵌入亲水基团，侧链屏蔽，在硅胶表面带电，杂化等)或者改变碳载量，在方法上改进(衍生)，让它在小分子化合物的分离都有很大的优势。大极性，中等极性，小极性，都是可以实现分离。C18柱因分离度高、使用寿命长、平衡时间短、背压低、柱效高、分离度佳等特性，已成为药物分析中使用频率高、应用范围较广的一款色谱柱，占据液相色谱分析柱的半壁江山。