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- 使用凝胶色谱柱进行分离的过程是什么样的
- 点击次数：939 更新时间：2023-09-08
- 凝胶色谱柱也被称为分子筛柱或凝胶过滤柱，是一种常用的色谱柱，用于根据分子大小分离和纯化样品中的生物大分子。它基于溶液中大分子与凝胶颗粒之间相互作用的差异来实现分离。TSK GEL HHR系列装填有粒径为5μm的苯乙烯二乙烯基苯共聚物填料，该类色谱柱又优良的溶剂可置换性和耐用性。TSK GEL G2000HHR高使用温度可到60℃。使用凝胶色谱柱进行分离的过程如下：样品加载：将待测样品以溶液形式加载到色谱柱上，样品中的生物大分子会进入凝胶颗粒的孔隙中。分离过程：在柱中，较大的生物大分子由于体积较大而无法进入凝胶颗粒的内部，从而通过柱床快速流出；而较小的生物大分子会进入凝胶颗粒的孔隙中，因此在柱中停留的时间较长。提取纯化：根据分子的大小，通过逐步洗脱柱床，收集到不同分子大小的组分。较大的分子会首先洗脱，而较小的分子则在较后的洗脱过程中被收集。凝胶色谱柱的优点包括：分子选择性：通过调整凝胶颗粒的孔隙大小和性质，可以选择性地分离目标生物大分子。不需高压：相对于其他色谱技术，操作简单，无需高压。保持活性：由于色谱柱在分离过程中使用柔软的凝胶材料，因此生物大分子的活性可以被更好地保持。凝胶色谱柱的填料是由多孔性凝胶颗粒构成，这些颗粒可以具有不同的孔隙大小和排列方式，以实现对大分子的分离。常用的凝胶材料包括琼脂糖、聚乙二醇、聚丙烯酰胺等。为了获得高质量的分离结果，选择合适的填料材料和柱尺寸非常重要。此外，凝胶柱的操作和储存应遵循生产商提供的说明书或建议，并且对于每次使用前都应进行柱的再平衡和校正。