使用TSKgel UP-SW3000进行单克隆抗体分析柱

近年来，抗体药物市场在逐步扩大，未来的几年仍将持续发展。越来越多的抗体药物将会应用到疾病的治疗中。尺寸排阻色谱法（SEC）广泛用于抗体中单体，二聚体，聚集体和片段等的分析和定量中。为实现更高的分离度和更快的分析时间，色谱柱生产厂家优化了填料颗粒化学和色谱柱填充方法,近年来,2μm和亚2μm粒径SEC色谱柱相继问世.

通过这种方法使得一些样品的分析结果得到了改善，但由于一些新型抗体药物具有高度的疏水性，抗体在色谱柱凝胶基质上的非特异性吸附使得抗体药物的分析仍然具有一定的挑战。在本应用指南中，使用TSKgel®UP-SW3000，2μmSEC色谱柱分析单克隆抗体（mAb），并在pH 6.7的磷酸钠缓冲液中添加15％IPA。如图所示，峰分离度和保留时间变化均不受影响。

HPLC实验条件

色谱柱：TSKgel UP-SW3000，2μm，4.6 mm ID x 30 cm

仪  器：Chromeleon®（7.2版）运行的UltiMate®3000 UHPLC系统

流动相：100 mmol / L KH2PO4 / Na2HPO4中的15％IPA，pH 6.7，100 mmol / L Na2SO4、0.05％NaN3

流  速：0.30 mL / min

检  测：紫外线@ 280 nm

温  度：30˚C

压  力：22 MPa（最大色谱柱压力为34 MPa）

进样量：5μL，4 mg / mL

样  品：USP mAb标准品

使用TSKgel UP-SW3000进行单克隆抗体分析柱

结果与讨论

将USP mAb标准品注射到TSKgel UP-SW3000 4.6 mm ID×30 cm色谱柱上，利用磷酸钠缓冲液pH 6.7为流动相，样品具有出色的重现性，如图1所示。该图显示了以0.3 mL / min的流速连续进样14针USP mAb标准样品，单体，二聚体，聚集体和碎片峰的保留时间几乎不变，每次进样的峰宽和峰形非常一致。

北京绿百草科技发展有限公司成立于1999年，坐落于北京市昌平区企业墅上区，是一家专业经营纯化填料、色谱柱、化学试剂和实验室设备及相关技术服务的科技型企业，产品主要应用于制药、生物、食品、环境和农业等领域。凭借较好的产品和服务，绿百草科技与广大客户建立了长期稳定的战略合作关系，被众多企业和科研机构认定为“供应商"，得到了政府部门的关怀和有力支持。
    经过十多年的快速发展，绿百草科技创建了产品种类齐全、技术服务的色谱耗材平台。绿百草科技被众多国际供应商选择为他们在中国区的代理，包括美国Restek公司、美国Zymo Research生物科技公司、日本三菱化学株式会社、加拿大SiliCycle股份有限公司、日本GL Sciences株式会社、美国Benson聚合物股份有限公司、日本东洋曹达株式会社、日本大赛璐化学工业株式会社、日本Nacalai Tesque株式会社、日本信和化工株式会社、日本住化分析株式会社等。同时，还提供美国USP标准物质、欧洲药典标准物质EDQM、英国化学学会LGC标准物质、加拿大TRC标准物质等。目前，绿百草科技已成为国内制药、生物、食品、环境和农业等领域的较大供应商之一。